久久久久久A片免费播放,国产99久久久国产精品潘金莲,又大又紧又粗C死你视频,欧美性猛交XXXX黑人

免費(fèi)咨詢熱線:
15522676233
資料下載
首頁(yè) > 資料下載 > 分離純化蛋白質(zhì)內(nèi)序列分析用肽段的材料與步驟

分離純化蛋白質(zhì)內(nèi)序列分析用肽段的材料與步驟

 發(fā)布時(shí)間:2023/7/17 點(diǎn)擊量:1198

材料與儀器

材料與設(shè)備

考馬斯亮藍(lán) G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液)

乙酸 (5% 10% 甲醇溶液)

甲醇 (50% 的水溶液和 10% 的水溶液)

SpeedVac 型旋轉(zhuǎn)濃縮器(Savant Instruments,Inc.)

Achromobacter 胰蛋白酶 I〔賴氨酰內(nèi)肽酶;50ng/ul 0.1mol/LTri-HCl(pH9.0)

Tween-200.1% 0.1mol/L Tris-HCl(pH9.0) 溶液〕

UltrafreeTM MC 濾器(22um;Millipore Corp.)

CF3COOH(TFA;0.1% 50% 乙腈溶液)

C18 反相 HPLC (2.1X250 mm;5um,300A)(VYDAC)

乙腈

2-丙醇

步驟


操作流程如下:

1) SDS-PAGE 分離待研究蛋白。

2) 凝膠用 0.05% 考馬斯亮藍(lán) G 染色 15~30 min

3) 用含 5% 乙酸的 10% 甲醇溶液脫色。

4) 在水中浸泡 10 min

5) 從凝膠上切下蛋白帶,轉(zhuǎn)移至微量離心管。切下一段不含蛋白質(zhì)的凝膠作對(duì)照。如必要,可將凝膠切成較小的碎片,使之能容易地沉入微量離心管的底 部。

6) 各管加入 1 ml 50% 甲醇。室溫下孵育 20 min。棄上清。

7) 各管加入1ml 10% 甲醇。室溫下孵育 20 min。棄上清。

8) 凝膠碎片在 SpeedVac 型旋轉(zhuǎn)濃縮器中干燥 2 min

9) 各管加 10ul Achromobacter 蛋白酶 I

10) 各管加最小體積的含 0.1%Tween-20 0.1mol/L Tris-HCl(pH9.0)—剛夠淹沒(méi)凝膠碎片即可。
注:凝膠碎片會(huì)膨脹, 故重要的是要保證它們?nèi)阅苎蜎](méi)在含去垢劑的緩沖液中。

11) 各管 30℃ 孵育 24 小時(shí)。

12) 各管在微量離心機(jī)中離心,將各管上清轉(zhuǎn)移至 22-um Ultrafree MC 濾器內(nèi)。12000r/min 離心 2 min。保留濾液。

13) 1 體積含 0.1%TFA 50% 乙腈溶液于各管留下的凝膠碎片中--足夠淹沒(méi)凝膠碎片。4°C 孵育 30 min。

14) 重復(fù)第 12、13 步操作。合并各樣品的濾液。

15) 樣品在 SpeedVac 型旋轉(zhuǎn)濃縮器中旋轉(zhuǎn)濃縮至體積小于 100 ml。加適量 HPLC 平衡液,制成供 HPLC 分析用的樣品。

16) 用反相 HPLC C18 柱分離消化液中的肽段。用含 0.09% TFA 的乙腈/2-丙醇 (3:1) 梯度洗脫肽段。于 214mn(對(duì)肽鍵)和 295nm(對(duì)色氨酸)檢測(cè)肽段的 UV 吸收。


北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供BioToolomics蛋白質(zhì)內(nèi)序列分析用純化肽段產(chǎn)更多有關(guān)蛋白質(zhì)內(nèi)序列分析用純化肽段產(chǎn)品及資料,請(qǐng)聯(lián)系百奧創(chuàng)新客服!

文件下載    圖片下載    
精品日产高清卡1卡2区别在哪里| 国产亚洲大尺度无码无码专线| 亚洲成AV人无码亚洲成AV无码| 人妻VA精品VA欧美VA| 曰曰摸日日碰夜夜爽歪歪| 尤物视频在线观看| 一区二区三区精华液| 亚洲AV区无码字幕中文色| 亚洲国产精品日韩AV不卡在线| 亚洲AV无码成人精品久久久蜜| 无码一区二区三区| 乱LUN合集1第40部分阅读| 少妇高潮毛片免费看| 老旺的大肉蟒进进出出| 99精品免费久久久久久久久日本| 高H猛烈失禁潮喷A片在线观看| 男女啪啪做爰高潮40分钟| 国产色情18一20岁片A片| АⅤ资源天堂资源库在线| 东北女人水多毛又多XXXX| 国产在线拍揄自揄拍无码视频| 强 暴 疼 哭 处 女| 亚洲精品久久久口爆吞精| 色综合久久久久综合体桃花网| 人妻被按摩师玩弄到潮喷| 在线永久免费观看黄网站| 黑人大荫道BBWBBB高潮潮喷| 99久久大香伊蕉在人线国产| SM女人捆绑调教网站A片软件| 蜜桃臀无码内射一区二区三区| 精品无码人妻一区二区免费蜜桃| 肉妇春潮干柴烈火MYFDUCC| 国产AV人人夜夜澡人人爽| 精品国模一区二区三区| 她扒下内裤让我爽了一夜A片| 含着奶头搓揉深深挺进P漫画| 天堂MV在线MV免费MV香蕉| 小SAO货水好多真紧H无码视频| 精品久久久久久亚洲综合网| 99久久99久久免费精品小说| 青草视频在线播放|